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高效液相色谱法(三)

来源:拜将封侯网编辑:时尚时间:2024-05-17 06:32:36

氦气鼓泡脱气法:向行动相中吹入氦气,高效把消融在行动相中的液相空气照料出。该措施每一年约莫要破费掉一瓶高纯氦气,色谱老本偏高,高效但脱气下场好,液相可用于低压梯度洗脱。色谱在0.5MPa的高效压力下,先以100mL/min,液相鼓泡15min,色谱而后以20~30mL/min坚持。高效

③高效液相色谱仪装备行动相在线脱气装置:它属于分解树脂膜过滤器。液相消融在行动相中的色谱气体可能从膜中被真空脱出,而液体不会从膜中进去。高效脱气下场最佳。液相

(3)低压输液泵:由于高效液相色谱柱中填料颗粒较细,色谱艰深是5~10μm,而且致密。这样经由色谱柱的行动相会受到很大的阻力,为延迟合成光阴,必需运用低压泵,向色谱柱提供流量晃动、重现性好的行动相。对于低压输液泵的要求,一是流量晃动,输入的行动相脉冲小,流量精度以及一再性优于0.3%;二是流量规模宽,合成型为0.1~10mL/min规模内不断可调且简略调节,顺应微柱的低压泵最小体积流量为0.01mL/min,制备型色谱仪所用低压输液泵最大流速可达100mL/min;三是输入压力高,密封功能好,最高输入压力可达40~50MPa;四是泵液缸体积小,利便替换行动相,削减零星失调时问;五是耐侵蚀性好,多用不锈钢、聚四氟乙烯质料制作,也实用详尽陶瓷的,泵的活塞多接管石英杆,单向阀艰深为做作红宝石或者蓝宝石;六是具备等度以及梯度洗脱功能,噪声低且具备清静过压呵护装置;七是易于呵护以及培修。

商品低压输液泵有恒流、恒压两种规范。恒流泵使输入的液体流量晃动,而恒压泵使输入的液体压力晃动。恒流泵有往返式柱塞泵以及注射泵,恒压泵有气动淘汰泵。在色谱实际合成操作中,色谱柱零星的阻力由于某些原因可能有所变更,因此恒流泵比恒压泵更优异,组分的保存光阴相对于晃动。在当初高效液相色谱仪上接管至多的是并联双泵头往返式柱塞泵。使命时电念头建议公平轮转折,公平轮驱动活塞在液缸内往返行动。柱塞向后行动时,液缸内组成真空,这时溶液进口单向阀封锁,行动相在大气压力或者正压下自溶剂进口单向阀进入液缸。柱塞向前行动时,单向阀措施反向,抵达确定压力时,行动相自溶剂出El单向阀压出到色谱柱。如斯周而复始,使行动坚陆续进入色谱柱。当柱塞往返行动减速时,提供的流速加大,反之就小。由于在泵处于吸液冲程时不输入,行动相流量的脉动将使仪器无奈个别使命,以是多接管双柱塞以及加脉动阻尼器来削减脉动。削减柱塞,脉动减小,流量更平稳,但泵老本高,倾向率也高。若想让柱塞泵个别使命,一个很紧张的条件便是液缸内不能进入气泡或者进入后实时倾轧。柱塞密封垫(亦称泵封)是易损件,当泵漏液时必需替换。

压力展现单元比力多,我国当初法定接管的尺度压力单元为Pa。

(4)梯度洗脱装置:在合成历程中,两种或者以上的溶剂作为行动相的比例不爆发变更的洗脱方式称为等度洗脱。等度洗脱的短处是色谱柱不断处于失调形态,合成周期短,能不断进样,组分保存光阴重现性好;其缺少是可能存在有些组分短期内无奈洗脱进去,因此需要定期用100%乙腈或者甲醇将色谱柱残缺冲洗清洁。所谓梯度洗脱,便是将两种或者两种以上差距极性的溶剂妨碍混合,作为行动相运用。进样后,不断不断地按制定的挨次修正行动相的配比,使洗脱能耐逐渐变更。由于行动相极性爆发变更,使患上抉择性患上以改善,是之后退了分说能耐,延迟了分说光阴。罕用的梯度洗脱方式有低压梯度洗脱以及低压梯度洗脱。低压梯度装置是用低压泵分说将两种或者三种差距极性的溶剂输入混合器,短缺混合落伍入色谱柱。

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